Page 39 - Programa 2021

XIX Congreso Argentino de Medicina Reproductiva – SAMeR 2021
ferir, mejorando así la calidad del programa de acuerdo con las recomendaciones detalladas
PGT-A. En su conjunto los resultados presen- en los protocolos mencionados. Para el análisis
tados concuerdan con la necesidad de estanda- posterior, se utilizó el software BlueFuse Multi
rizar los protocolos de detección para el correc- (Illumina) y ChromGO (Yikon) para las mues-
to manejo de los embriones mosaicos. tras de TE y medio, respectivamente.
Para el análisis de embriones completos (EC),
los blastocistos previamente diagnosticados
VALIDACIÓN DE UN PROTOCOLO DE Pg- como aneuploides se desvitrificaron y se cul-
TA-A NO INVASIVO. PRIMERA EXPERIENCIA tivaron durante 24 horas. en las condiciones
EN ARgENTINA. descritas anteriormente. Posteriormente, tanto
Dr. Ahumada Ariel O. ; Dr. Leocata Nieto el MC como el EC fueron recolectados para su
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Francisco ; Dr. Zubrzycki Jeremías ; Dr. Dopa- análisis por NGS, luego de la amplificación del
a
b
b
zo Hernán . ADN por MALBAC (Yikon Genomics)
INSTITUCIÓN: PROCREARTE. BIOCÓ-
a
b
DICES. RESULTADOS: La AGC fue 100% efectiva
para todas las muestras (TE, MC y EC).
OBJETIVO: Validar un protocolo de PGT-No mc vs. te mc vs. ec
invasivo (NI-PGT; Yikon Genomics) compa-
rando los resultados obtenidos con aquellos concordancia para la 87% 85%
polidía del embrión
derivados del estudio de biopsias de trofecto- sensibilidad 81% 100%
dermo (TE).
especificidad 100% 71%
DISEñO: Este estudio evaluó inicialmente la valor predictivo positivo 100% 75%
concordancia del estado de ploidía de mues- valor predictivo negativo 69% 100%
tras de ADN obtenidas del medio de cultivo
(MC) de blastocistos de D5/D6 y de biopsias En 8 casos pudimos comparar los resultados
de TE. En una segunda etapa, se compararon obtenido de las 3 fuentes de ADN:
ambos resultados con los obtenidos al analizar n= 8 mc vs. ec te vs ec
embriones completos, previamente diagnosti-
cados como aneuploides. sensibilidad 100% 100%
especificidad 71% 50%
MATERIALES y METODOS: Los embriones concordancia para la 85% 50%
(n=30) fueron cultivados en microgotas de 30 poidía del embrión
µl demedio Global Total LP (Life Global) (37 °
C, 5% O2 y 6% CO2) hasta el momento de las CONCLUSIONES: NiPGT-A a partir de cfD-
biopsias de TE en D5-D6. Realizadas las biop- NA mostró excelentes resultados en compa-
sias, los embriones fueron transferidos a una ración con el método gold standard actual
cápsula adicional hasta su criopreservación. El (biopsia TE). Las discordancias corresponden
MC de la placa original se transfirió a tubos de a cuatro falsos negativos, donde el método no
PCR que contenían 5 µl de buffer de lisis (Yi- invasivo mostró resultados euploides mientras
kon Genomics) y almacenadas a -80 °C hasta que la biopsia TE mostró aneuploidías. Si niP-
su procesamiento. La amplificación del genoma GT-A es una representación más confiable de
completo (AGM) y la posterior preparación de todo el embrión que la biopsia TE, este 13% de
la biblioteca para las muestras de TE se realiza- discordancia es el tipo de resultado que señala
ron siguiendo el protocolo Veriseq (Illumina). que el método no invasivo es una valiosa he-
Mientras que para las muestras de MC se uti- rramienta alternativa para PGT-A. Los resulta-
lizó el protocolo NICSInst (Yikon Genomics). dos obtenidos comparando TE y MC con AGC
Todas las muestras (de TE y MC) se secuencia- mostraron que MC sería más representativo de
ron utilizando la plataforma Illumina MiSeq de EC que de TE.

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